التحضيرات المجهرية الضوئية النظرية والتطبيق

الاحياءالعلمية

التحضيرات المجهرية الضوئية النظرية والتطبيق

الاستاذ الدكتور حميد احمد الحاج
السعر: 15.00 $
عدد الصفحات: 240
نوع التجليد: كرتونية
رقم الطبعة: 3
لون الطباعة: اسود
القياس (سم): 17x24
الوزن (كغم): 0.550
الباركود: 9788957066406
السعر: 15.00 $

التحضيرات المجهرية الضوئية النظرية والتطبيق

الاحياءالعلمية

الاستاذ الدكتور حميد احمد الحاج
عدد الصفحات: 240
نوع التجليد: كرتونية
رقم الطبعة: 3
لون الطباعة: اسود
القياس (سم): 17x24
الوزن (كغم): 0.550
الباركود: 9788957066406

وقع من الطلبة الذين يدرسون مادة التحضير المجهري، إعداد شرائح مجهرية تساعد في دراسة الخلايا والأنسجة والأعضاء. ويمكن إتمام هذا، بأربع طرائق تحضير رئيسية هي: التقطيع والمسح أو الفرش والهرس أو الدعك والتحضيرات الكاملة . وسنوجز فيما يلي هذه الطرائق الأربعة، ومن ثم سيتم تفصيلها بشكل موسع في فصول لاحقة.

1. التقطيع: في هذه الطريقة يتم قطع الأنسجة، إلى مقاطع رقيقة جداً 10mµ)). ولكون كثير من الأنسجة النباتية والحيوانية طرية يصعب قطعها، فيجب أن تقسّى قبل عملية القطع، وذلك بتثبيت النسيج بمواد كيماوية مناسبة لحفظه.

    ولتحضير النسيج للقطع يجب غسل المثبت عنه، ثم إزالة الماء منه، وترويقه، وطمره في الشمع ليتشربه خلال خلاياه. وهكذا يعمل الشمع كدعامة داخل النسيج، تُمكّن من قطعه إلى مقاطع يصل سمكها إلى عشرة ميكرومترات. وبعدها، توضع المقاطع على شرائح مجهرية، وتصبغ وتغطى بأغطية زجاجية رقيقة. وفي الحالات الطارئة، التي يُحتاج فيها إلى شرائح بسرعة، كما في الدراسات المرضية، يمكن الاستغناء عن كل ما سبق ذكره في تحضير المقاطع، بتجميد النسيج الذي يسمى خزعة ثم قطعه وصبغه في الحال.

     والمقاطع تكون إما طولية أو عرضية، أو جبهية (أمامية) .

2.  المسح أو الفرش: في هذه الطريقة، يمسح السائل، كالدم أو البول، أو مزرعة البكتيريا، أو مسحة من الحنجرة أو المهبل، ويفرش كطبقة رقيقة على شريحة زجاجية، ويمكن عمل ذلك من الأنسجة الرخوة الطازجة، كالنخاع الشوكي والحويصلات المنوية. وتصبغ المسحات وتجفف في الهواء ثم تغطى.

3. الهرس أو الدعك: بعض الأنسجة ليست رخوة بدرجة تكفي لفرشها على الشرائح، وليست قاسية بما فيه الكفاية، ليتسنى قطعها دون طمرها في الشمع. لذا، فإن الهرس هو الطريقة المثلى لتحضيرها، وذلك بفصل الخلايا عن بعضها، عبر تفكيك المادة بين الخلوية. وفي العادة، تعمل تحضيرات دائمة أو مؤقتة بهذه الطريقة.

     ومن الأنسجة التي تحضر بهذه الطريقة، الأنسجة النباتية كالقمة النامية للساق والجذر والمبايض والبتلات. ومن الأنسجة الحيوانية الغدد اللعابية لذبابة الفاكهة DrosophilaMelanogaster .

4.  النماذج الكاملة Whole Mounts: في هذه الطريقة توضع العينة كاملة، إذا كانت صغيرة وشفافة بشكل يسمح بوضعها على شريحة، وتجري عليها عليمات التثبيت، وإزالة الماء، والترويق والصبغ والتغطية كما في المقاطع. وهذه الطريقة مفيدة في تحضير الكائنات الأولية أو الطفيليات أو الأجنة الصغيرة.وإذا كانت العينة كبيرة الحجم، فيؤخذ قسم منا يتناسب وحجم الحيّز المتاح على الشريحة.

    سنعالج في الجزء الأول من هذا الكتاب الأسس النظرية لخطوات تحضير الشرائح المجهرية. أما في الجزء الثاني، فسنتعامل مع التطبيقات العملية في هذا المجال.

الجزء الاول: الاسس النظرية

1.  التثبيت

2.  الغسل وإزالة الماء والترويق

3.  التشريب والطمر

4.  تقطيع وتحميل الأنسجة

5.  صبغ الأنسجة

6.  تغطية المقاطع ووسم الشرائح

7.  طرائق المسح والهرس والتجميد

8.  النماذج الكاملة

الجزء الثاني: التطبيقات

9.  الأدوات والزجاجيات

10. الأجهزة اللازمة في التحضير المجهري

11. مزيلات الماء ووسائط الترويق

12.  وسائط التشريب والطمر

13.  محاليل الصبغ والتمييز

14.  وسائط لصق وتغطية المقاطع

15.  تحضير مسحة دم إنسان

16.  تحضير هرسة من الغدد اللعابية لذبابة الفاكهة

17.  تحضير هرسة من قمة جذر البصل

18.  تحضير نماذج كاملة

19.  تحضير مقاطع من أنسجة حيوانية

20.  تحضير مقاطع من أنسجة نباتية

21.  تحضير مقاطع متسلسلة         

 

 

الجزء الأول  (الأسس النظرية)

1. التثبيت 

   فوائد التثبيت 

   مواصفات المثبت الجيد    

   أسس التثبيت    

   طرائق التثبيت 

   أساليب التثبيت 

2. الغسل وإزالة الماء والترويق 

    الغسل 

    إزالة الماء 

    الترويق 

3. التشريب والطمر 

    التشريب    

    الطمر    

    وسائط التشريب والطمر    

4. تقطيع وتحميل الأنسجة    

     التقليم    

     التثبيت على الحامل 

     التحضير للقطع 

     أنواع المقاطع 

     خطوات التقطيع 

     مشاكل التقطيع 

     تحميل المقاطع 

5. صبغ الأنسجة 

    نظرية الصبغ 

    تصنيف الصبغات 

    مرسخات الصبغة 

    طرائق الصبغ 

    التمييز 

    التحوّل اللوني 

    الصبغ الحيوي 

    حالات صبغ العينات 

6. تغطية المقاطع ووسم الشرائح 

    أهمية تغطية الشرائح 

    مواصفات وسط التغطية 

    أنواع وسائط التغطية 

    طريقة تغطية المقاطع 

    تنظيف ووسم الشرائح 

7. طرائق المسح والهرس والتجميد 

    المسح 

    الهرس (الدعك) 

    التجميد 

8. النماذج الكاملة 

    النماذج الكاملة المؤقتة 

    النماذج الكاملة المستديمة 

الجزء الثاني (التطبيقات)

9.  الأدوات والزجاجيات 

     أدوات التشريح 

     قوالب الطمر 

     حوامل قوالب الشمع 

     الزجاجيات 

     علب الشرائح 

     أدوات متفرقة 

10. الأجهزة اللازمة في التحضير المجهري 

     أجهزة التقطيع 

     سكاكين أجهزة التقطيع 

     أفران صهر الشمع 

     مناضد تدفئة الشرائح 

     الأجهزة المتخصصة 

11. المثبتات 

    مثبتات الفورمالين 

    مثبتات حمض البكريك 

    المثبتات المعدنية 

    المثبتات الكحولية 

12. مزيلات الماء ووسائط الترويق 

    مزيلات الماء 

    وسائط الترويق 

13. وسائط التشريب والطمر 

    الماء 

    الجيلاتين 

    شمع البرافين 

14. محاليل الصبغ والتمييز 

    الصبغات النووية 

    الصبغات السيتوبلازمية 

    صبغات النماذج الكاملة 

    الصبغات الحيوية 

    محاليل التمييز 

15. وسائط لصق وتغطية المقاطع 

    وسائط لصق المقاطع 

    وسائط تغطية الشرائح 

16. تحضير مسحة دم إنسان 

    مكونات الدم الخلوية  

    صبغات الدم المتعادلة 

    المحاليل والأدوات اللازمة 

    تحضير مسحة الدم 

    صبغ المسحة وتغطيتها 

    النتيجة 

17. تحضير هرسة من الغدد اللعابية لذبابة الفاكهة 

    المحاليل والأدوات اللازمة 

    تحضير الهرسة 

    النتيجة 

18. تحضير هرسة من قمة جذر البصل 

    المحاليل والمواد اللازمة 

    تحضير الهرسة وصبغها 

19. تحضير نماذج كاملة 

    تحضير نموذج كامل من طفيل تريماتودي 

    تحضير نموذج كامل من جنين دجاج 

20. تحضير مقاطع من أنسجة حيوانية 

    التجهيز للتثبيت 

    المحاليل والوسائط اللازمة 

    الأدوات والزجاجيات والأجهزة   

    الحصول على العضو المراد تثبيته 

    معالجة النسيج حتى التقطيع 

    صبغ المقاطع 

21. تحضير مقاطع من أنسجة نباتية 

    المحاليل والوساط اللازمة 

    الأدوات والزجاجيات والأجهزة   

    الطريقة   

    النتيجة   

22. تحضير مقاطع متسلسلة   

    لوزام التحضير   

    الطريقة 

    النتيجة 

الملاحق   

ملحق  الأوزان الذرية   

ملحق  محاليل ذات استعمال عام   

ملحق  تحضير محاليل أحادية العيارية   

ملحق  إعادة صبغة شرائح بهتت صبغتها   

مسرد المصطلحات   

 المراجع